HPLC法测定糖清胶囊中甘草酸和甘草苷的含量

目的:建立测定糖清胶囊中甘草酸和甘草苷含量的高效液相色谱法。方法:采用Kromasil Cl8色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)。甘草酸流动相为甲醇-0.2mo·ll-1醋酸铵溶液-冰醋酸(65:35:1);检测波长250nm;甘草苷乙腈-0.5%冰醋酸(18:82)为流动相;检测波长276nm;两者流速为1.0 ml·min-1,两者柱温为30℃;结果:甘草酸单铵盐在0.52~2.6μg/mg范围内呈现良好的线性关系;甘草苷在0.30~1.5μg/mg范围之内具有良好的线性关系。甘草酸和甘草苷回收率分别为98.1%、97.0%,R SD分别为1.32%、1.67%。结论:该法操作简便、准确,线性相关系数良好,且稳定性和重复性好,适用于糖清胶囊制剂甘草主成分的含量测定。     

RP-HPLC双波长法同时测定酸枣仁汤中5种成分的含量

目的建立RP-HPLC双波长同时测定酸枣仁汤中5种成分含量的方法。方法色谱柱:Kro-masil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-体积分数为1%的冰乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长:λ1=275 nm和λ2=340 nm,流速:1.0 mL.min-1,柱温:30℃。结果芒果苷、斯皮诺素、甘草苷、阿魏酸和洋川芎内酯I质量浓度分别在12.54～200.64、11.14～178.24、19.12～305.92、6.04～96.64、8.60～137.60 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率为95.1%～103.4%。结论该方法可作为酸枣仁汤的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据。     

不同柴胡配伍对柴葛解肌汤7种成分量的影响

目的柴胡为多基原药材,《中国药典》2010年版规定的柴胡包括柴胡Bupleurum chinense DC.和狭叶柴胡B.scorzonerifolium Willd.。以柴葛解肌汤为研究对象,对柴胡、狭叶柴胡配伍的复方进行化学成分比较,明确不同柴胡配伍对复方中其他成分的影响。方法首先采用HPLC法建立葛根素、芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素7种化学成分的定量测定方法,并对不同柴胡配伍的柴葛解肌汤进行定量测定。结果线性范围内7种化合物的标准曲线呈良好线性关系,平均加样回收率均在94.1%~106.6%,所有化合物的精密度、重复性的RSD均小于2%,且样品在12 h内稳定性良好。不同柴胡配伍对柴葛解肌汤7种成分的量影响无显著性差异。结论所建立方法简单,重复性好,可用于柴葛解肌汤的质量控制,而不同柴胡配伍对柴葛解肌汤中其他成分及全方药理作用的影响值得进一步研究。     

HPLC测定华盖散传统汤剂与颗粒汤剂中盐酸麻黄碱、苦杏仁苷、甘草酸、甘草苷的含量

目的：采用HPLC，测定华盖散（麻黄、苦杏仁、炙甘草等）传统汤剂、颗粒汤剂中盐酸麻黄碱、苦杏仁苷、甘草酸、甘草苷的含量。方法：选用Agilent SB-C18柱，以乙腈-0．1％磷酸（4：96）为流动相，在207nm波长测定盐酸麻黄碱；选用Agilent XDB-C18柱，流动相分别以甲醇-水（23：77），在215nm波长测定苦杏仁苷；甲醇-0．2mol／L醋酸铵-冰乙酸（67：33：1），在250nm波长测定甘草酸；乙腈-0．5％冰乙酸（20：80），在276nm波长测定甘草苷。结果：方中4个成分在传统汤剂与颗粒汤剂中的含量都有差异。颗粒汤剂中平均含量均大于传统汤剂中平均含量。结论：4种成分的峰都能有效分离，其测定方法简便、准确、重复性良好，方中其它成分对测定无干扰。     

甘草苷的电化学伏安行为及其应用

目的:研究了甘草苷(LQ)在碳糊电极(CPE)上的电化学行为及电化学动力学性质,据此建立了LQ的方波伏安法的新测定方法。方法:采用循环伏安法(CV)、控制电位电解库仑法(BE)、计时库仑法(CC)、计时电流法(CA)及方波伏安法(SWV)等电化学方法。结果:LQ在CPE上的电化学过程是一不可逆电化学氧化过程,氧化峰电位(Ep)为0.882 V。在扫描速度10～800 mV.s-1范围内其氧化峰电流与扫描速度平方根(υ1/2)呈良好的线性关系,表明LQ在CPE上的伏安行为是一受扩散控制的电极过程。用SWV法测定LQ的氧化峰电流与其浓度在1.8×10-7～1.6×10-3 mol.L-1(r=0.9964)范围内呈良好的线性关系,检出限8.0×10-8 mol.L-1,RSD 2.8%～3.2%,加样回收率98.0%～102.0%。结论:该方法简便快捷,用于中成药及模拟尿样中LQ含量测定,结果令人满意。     

Protective effects of liquiritin apioside on cigarette smoke-induced lung epithelial cell injury

Cigarette smoking is associated with an increased incidence of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). In this study, we hypothesized that liquiritin apioside (LA), a main flavonoid component from Glycyrrhiza uralensis, had antioxidant properties by inducing glutathione (GSH) biosynthesis via the inhibition of cytokines and protected lung epithelial cells against cigarette smoke-mediated oxidative stress. A549 cells were treated with cigarette smoke extract (CSE) and/or LA. ICR mice were exposed to cigarette smoke (CS) for four days with increasing exposure time for up to 6 h per day to elicit epithelial cells injury. One hour before smoke exposure, mice were treated with LA by gavage; 18 h after the last CS exposure all examinations were performed. Treatment with LA concentration-dependently prevented CSE-induced cytotoxicity, increase of TGF-β and TNF-α mRNA expression, depletion of GSH and apoptosis in A549 cells. LA at doses 3, 10 and 30 mg/kg dose-dependently inhibited pulmonary neutrophil and macrophage inflammation. Lung sections of the CS-exposed LA treated mice showed an apparently reduced pulmonary inflammation and a significant inhibitory effect on mucus containing goblet cells in the large airways. Furthermore, the CS-induced pulmonary release of TGF-β, TNF-α and myeloperoxidase activity was reduced, and superoxide dismutase activity was enhanced.These results indicate that protective roles of LA on CS-induced the lung epithelial cell injury are mediated by inhibiting TGF-β and TNF-α expression and increasing anti-oxidative levels of GSH, suggesting that LA might be effective as protective agent against epithelial injury in COPD.     

整合指纹图谱与多成分含量测定的酸枣仁汤质量评价研究

目的 利用HPLC-DAD-ELSD分析技术，建立酸枣仁汤指纹图谱结合多成分含量测定方法，为其质量控制提供参考。方法 采用Phenomenex C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm)，以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，柱温30℃，在282 nm和335 nm检测波长下，分别以芒果苷和斯皮诺素为参照峰；ELSD漂移管温度105℃，载气体积流量2.5 L/min条件下，以酸枣仁皂苷A为参照峰，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对10批自制酸枣仁汤进行相似度评价；同时建立13个指标成分含量测定方法，应用于市售产品及自制样品的质量评价。结果 10批自制酸枣仁汤的平均出膏率为21.57%，在282 nm和335 nm分别标定了5个和4个共有峰，相似度分别为0.907～0.999、0.926～0.999;HPLC-ELSD指纹图谱中标定了4个共有峰，相似度为0.946～0.999。13种指标成分在各自的线性范围内线性关系良好(r>0.995 9)，平均加样回收率为93.69%,RSD值平均为2.04%。10批...     

HPLC-CAD法检测小建中合剂中6个活性成分及稳定性研究

目的 利用高效液相色谱联合电喷雾检测器（HPLC-CAD），建立同时测定小建中合剂中芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸、桂皮醛及6-姜辣素含量的检测方法，并对小建中合剂稳定性进行研究。方法 采用Thermo Hypersil GOLD C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以80%乙腈（A）-10 mmol·L^-1甲酸铵（甲酸调pH值至4.0）（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL·min^-1，柱温35℃，CAD雾化器温度为35℃，过滤常数为5.0，采集频率为10 Hz，进样量20 μL。同时测定小建中合剂在加速及长期试验下各成分含量的变化。结果 各成分分离度均良好，阴性无干扰；芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸、桂皮醛及6-姜辣素的线性范围分别为2.01～40.16、4.21～84.20、1.18～23.64、0.60～12.04、0.70～14.06及1.30～25.90 μg·mL^-1（r≥0.999 1）；平均加样回收率（n＝6）为97.55%～98.46%，RSD≤3.0%。稳定性研究结果表明，芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、桂皮醛及6-姜辣素在加速条件下各成分质量浓度有明显下降，提示本品种不宜在高温下长时间放置。结论 经方法学验证，建立的HPLC-CAD法具有良好的灵敏度及准确度，为小建中合剂的全面质量控制提供科学依据，本品应置阴凉处贮藏。     

不同软化方法对甘草质量的影响

目的基于HPLC建立甘草指纹图谱及同时测定甘草中6个成分含量的分析方法,并考察4种软化方式(淋润、常压蒸润、70℃减压蒸润与85℃减压蒸润)对甘草质量的影响。方法采用紫外分光光度法,以甘草苷、甘草酸为对照品,测定甘草中总黄酮及总皂苷的含量;基于HPLC同时测定甘草中甘草苷、芒柄花苷、异甘草苷、甘草素、刺甘草查耳酮、甘草酸6个成分的含量,比较了不同软化方法处理后的甘草中指标成分含量的变化;利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对不同软化处理后的甘草样品进行相似度评价,并进行聚类分析。结果总黄酮、总皂苷的结果显示,未加工过的甘草中总黄酮与总皂苷的含量最高,淋润的甘草总黄酮与总皂苷含量偏低。常压蒸润、70℃减压蒸润和85℃减压蒸润这3种处理方法对甘草质量影响不大;含量测定结果显示,不同软化处理后,异甘草苷的含量均显著降低,而不同的软化处理组之间,所有成分含量差异不显著。指纹图谱相似性评价与聚类分析表明,3批甘草不同软化处理方法后的样品与未加工组分别聚为一类,而不同软化处理方法对于甘草整体化学成分组成无显著差异。结论建立的分析方法,能够快速、准确地同时测定甘草中的6种成分,而且尤其需要对软化过程中异甘草苷的含量进行监测。综合生产成本、生产效率及不同指标的质量评价结果,常压蒸润在生产过程中可行性最高。本研究为甘草软化的大生产提供了理论指导,有利于进一步规范甘草饮片的生产流程。     

藏药白脉软膏多成分定量、指纹图谱结合多元统计分析的质量控制研究

目的建立白脉软膏的指纹图谱并测定其主要成分的含量,结合多元统计分析对其2个产地14个批次质量进行科学全面地评价,为其质量控制提供依据。方法采用HPLC法对白脉软膏中的主要成分甘草苷、甘草酸铵、甘松新酮、姜黄素进行含量测定,建立了白脉软膏的指纹图谱,通过指纹图谱相似度分析、聚类分析、主成分分析(PCA)和因子分析对2个产地的不同批次白脉软膏质量进行全面评价。结果甘草苷、甘草酸铵、甘松新酮、姜黄素的含量测定方法学考察符合要求,质量分数分别为0.051～0.200 mg/g、0.136～0.622 mg/g、0.030～0.345 mg/g、0.001～0.069 mg/g。建立的白脉软膏指纹图谱共标定17个共有峰,经对照品指认共鉴定出甘草苷、甘草酸铵、甘松新酮3个色谱峰,14批样品的相似度均大于0.975。聚类分析中2个产地14批白脉软膏可以分为4类,其中西藏林芝市生产的批次S1～S11聚为一类,甘肃省兰州市生产的S12聚为一类,S13聚为一类,S14聚为一类。PCA和因子分析结果显示甘肃省兰州市生产的3个批次S12～S14主成分综合得分均高于西藏林芝市生产的11个批次S1～S11,推测是因为产地生产条件或药材来源变化导致了质量的差异,与聚类分析结果一致。结论首次建立白脉软膏含量测定、指纹图谱结合多元统计分析的质量控制方法科学可靠,不但可以用于白脉软膏的质量控制,还可以对其不同产地批次质量进行全面评价,为白脉软膏质量标准的提高和中药批次间的质量评价提供借鉴。